作者：首都医科大学附属北京中医医院 屈凡凡

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Q什么是免疫组化?A

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免疫组化是免疫组织化学（IHC）或免疫细胞化学（ICC）的简称，是应用免疫学基本原理—抗原抗体反应，即抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂（荧光素、酶、金属离子、同位素）显色来确定组织细胞内抗原（多肽和蛋白质），对其进行定位、定性及相对定量的研究。免疫组化结果获取过程中最关键的步骤是使用正确的抗体和抗原特异结合并对信号进行放大，以期达到对组织或细胞中的未知抗原进行定性，定位或定量。

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患者在做胃肠镜时，医生会对有问题的部位进行病理组织活检，进行病理学诊断。（病理诊断是诊断疾病的金标准）

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对胃肠镜病理报告上的免疫组化应该怎么解读呢？很多患者一头雾水，根本看不懂，非病理科专业的临床医生也有困惑。下面整理一下常见的免疫组化知识点全是干货

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一

免疫组织化学（IHC）染色目的

1

判断组织来源

例如:广谱的CK (CK混)和Vimentin染色结果，鉴别组织上皮来源或间质来源;

如果上皮来源：

·根据CK5-6 和CK8-18,识别是鳞状上皮或腺上皮来源;·或根据CK7和CK20,识别上消化道还是下消化道来源;·或根据AFP, 鉴别胃肠道粘膜上皮细胞还是肝细胞起源;·或根据Syn、CgA，确定是否为神经内分泌细胞起源。

2

鉴别良恶性

·常见肿瘤标志物CEA、CA19-9、CA72-4、CA12-5等;·反应细胞增殖状态Ki-67，是某些恶性肿瘤预后的一个重要指标，阳性率越高，肿瘤增殖越快，恶性程度越高；·监测凋亡状态P53，是肿瘤预后标记物之一，如果p53阳性，通常提示预后不佳。

3

指导治疗（靶向治疗）

·HER2 赫赛汀·EGFR 西妥昔单抗·TNF-a 英夫利昔

二

免疫组织化学染色指标及意义

1

CD系列

·CD3: 目前是T细胞标记物的首选。95%以上的T细胞或NK细胞淋巴瘤阳性表达。·CD4: 辅助T细胞。与CD8联合使用，对于某些疾病的诊断、疗效观察及预后有一定意义。·CD8: 细胞毒T细胞。一般与CD4联合使用。·CD10: 为滤泡中心细胞的标记。Burkitt淋巴瘤/生发中心母细胞/生发中心滤泡性淋巴瘤可阳性。·CD15: 是成熟粒细胞、R-S细胞的标志之一。主要用于标记霍奇金淋巴瘤。·CD20: B细胞的标记。主要用于B细胞淋巴瘤的诊断。·CD21: 主要用于B细胞、滤泡树突状细胞及其来源的肿瘤。·CD30: 主要用于R-S细胞和大多数间变性大细胞淋巴瘤的标记。·CD31: 内皮细胞标记。主要用于良、恶性血管源性肿瘤和鉴别诊断以及肿瘤中血管分布的研究。·CD34: 内皮细胞标记。主要用于良、恶性血管源性肿瘤和鉴别诊断以及肿瘤中血管分布的研究。与CD117联合用于诊断间质瘤。·CD38: 标记浆细胞。·CD56: 是NK细胞淋巴瘤比较好的标记物。还可用于神经源性肿瘤的辅助诊断。·CD57: 自然杀伤细胞。主要用于NK细胞介导的细胞毒、NK细胞及T细胞亚群的功能方面的研究。·CD68: 巨噬细胞。可作为组织细胞标记物及骨髓白血病的的鉴别。·CD99: 有助于尤文肉瘤、原始神经外胚叶肿瘤、小圆细胞肿瘤进行鉴别。也可用于鉴别胸腺上皮性肿瘤。·CD117: 是胃肠道间质瘤的特异性标记物，可用于指导格列卫药物治疗。·CD138: 主要用途是对浆细胞进行定量。·CD146: 可用于肿瘤血管生成和转移等方面的研究。·CDX2: 主要用于浸润性结/直肠癌的诊断和研究。

2

CK系列

·CK(Pan)/AE1/AE3: 主要用于标记上皮及上皮来源肿瘤。·CK(HMW)/34BetaE12: 是前列腺基底细胞特异性标记物。与P63联合鉴别诊断前列腺癌与前列腺增生。·CK7: 是腺癌和移行细胞癌比较特异的标记物。但在胃肠道阴性。还可用于卵巢癌的辅助诊断。·CK18: 低分子量角蛋白，主要标记各种单层上皮包括腺上皮，而复层鳞状上皮常阴性，主要用于腺癌诊断。·CK19: 主要用于腺癌的诊断以及转移性腺癌和肝癌的鉴别诊断。·CK20: 主要标记胃肠道上皮细胞及其来源肿瘤。乳腺癌、肺癌、卵巢非黏液性肿瘤和神经内分泌肿瘤阴性。

3

其他

·Syn: 突触素。标记神经内分泌肿瘤。·Desmin: 结蛋白。主要用肌源性肿瘤的诊断。·S100: 用于神经性肿瘤的诊断和鉴别诊断。在多种肿瘤可表达。·Vimentin: 在癌与肉瘤、淋巴瘤的鉴别诊断中有重要意义。·Villin: 绒毛蛋白，刷状缘的上皮细胞表达，通常肠癌表达阳性。·VEGF: 血管内皮生长因子受体。用于肿瘤研究。·Bcl-2: 主要用于滤泡性淋巴瘤、毛细胞性白血病的辅助诊断及细胞凋亡方面的研究。·CerbB-2: 主要作为判断乳腺癌、卵巢癌、子宫内膜癌及消化道肿瘤预后的参考指标，并用于赫赛汀治疗乳腺癌的药物治疗的筛选。·EBV/EBER: 阳性提示EB病毒感染。·CMV: 阳性提示巨细胞病毒感染。·SSTR2: 生长抑素受体2，有助于神经内分泌瘤的诊断。·ACTH: 促肾上腺皮质激素。可用于垂体腺瘤的功能性分类，有助于区分原发性和转移性垂体肿瘤，某些神经内分泌肿瘤也可出现阳性反应。·Actin: 肌动蛋白。用于标记骨骼肌、心肌、平滑肌及其来源的肿瘤。·AFP: 甲胎蛋白。用于标记肝癌、卵黄囊瘤和某些生殖细胞肿瘤。

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三

常见的消化道疾病免疫组化染色指标

1

食管

（1）Barrett’s食管

阳性: CK20，MUCs，CDX2，P53

（2）鳞状细胞癌(普通型)

阳性: CAM5.2，AE1/AE3，CK5/6，34βE12，CK14，P63(部分)，CK19

阴性: CK7，CK20，WT-1，CD5，TTF-1

（3）基底细胞样鳞癌

阳性: Bcl-2，CK5/6，CK13，CK14，CK19，P63，S-100

阴性: CAM5.2，AE1/AE3

（4）腺癌

阳性: CK7，CK20

阴性: P63

365建站客服QQ：800083652（5）腺样囊性癌

阳性: CAM5.2，AE1/AE3，CD117 (导管分化细胞) 34βE12，CEA (肌上皮分化细胞) S-100，SMA，vimentin，P63

阴性: CgA，Syn

（6）黏液表皮样癌

阳性: (鳞状上皮样区域) 34βE12，CK14，P63 (腺上皮区域) CK7，CEA

（7）平滑肌瘤

阳性: SMA，desmin，MSA，calponin

阴性: CD34，CD117，S-100

（8）平滑肌肉瘤

阳性: SMA，desmin，vimentin

阴性: CD34，CD117

（9）胃肠道间质瘤

阳性: CD34，CD117，PDGFRA，DOG1，PKCθ

（10）神经内分泌肿瘤

阳性: Syn，CgA，NSE，TTF-1，CD56

阴性: CK19，CK20，34βE12

（11）Kaposi肉瘤

阳性: CD31，CD34

（12）颗粒细胞瘤

阳性: S-100，CD57，vimentin

阴性: desmin，CD34，CD117，CAM5.2，EMA，CEA

（13）恶性黑色素瘤

阳性: vimentin，S-100，HMB45，MART/melan-A，tyrosinase

阴性: CK，CEA

（14）淋巴瘤(大B细胞淋巴瘤和MALT淋巴瘤多见)

2

胃部肿瘤

（1）胃腺癌

阳性: CAM5.2，Pan-CK，CK7，CK20，CK18，CK19，CDX2，CEA(部分)，villin(部分)，Her-2阴性: CK5/6，vimentin，P63(鳞化区域可阳性)，TTF-1，CA125(少量)

（2）神经内分泌分化的腺癌

阳性: CKs，CgA，Syn阴性: CD56

（3）印戒细胞癌

阳性: CDX2，CK20，CEA

（4）高分化神经内分泌肿瘤或小细胞癌

阳性: CgA，Syn，CDX2阴性: CK20，TTF-1，CK5/6 5.肉瘤样癌

（5）胃肠道间质瘤

阳性: CD117，CD34，CD99，SMA，HHF-35(25%-50%)，CK18(10%)阴性: Syn(n<5%)，desmin(2%)，CgA，S-100

3

小肠肿瘤

（1）神经内分泌肿瘤

阳性: CgA，Syn，CD57，villin，CEA，CDX2，CK20(25%)，somatostatin阴性: CK7，TTF-1

（2）GIST

阳性: CD117，CD34，Bcl-2，SMA，S-100(20%)阴性: desmin，CgA

（3）远端小肠腺癌(表型类似结肠癌)

阳性: CK18，CK19，CK20，CDX2，villin，MUC1，MUC5AC(33%)阴性: CK7，CK5/6，P63，vimentin

（4）壶腹部腺癌(表型类似胰胆管腺癌)

4

结直肠肿瘤

（1）神经鞘瘤

阳性: S-100，GFAP，CD34阴性: CD117

（2）神经纤维瘤

阳性: S-100，neurofilament阴性: CD117

（3）GIST

阳性: CD117，CD34，CD99，SMA阴性: GFAP，desmin，S-100，neurofilament

（4）平滑肌瘤

阳性: SMA，MSA，desmin阴性: CD117，CD34，S-100

（5）神经内分泌肿瘤 (右半结肠)

阳性: serotonin，CgA，Syn，CK20(50%)，CK7(25%)阴性: S-100，TTF-1神经内分泌肿瘤(直乙结肠)阳性: CgA，Syn，PAP(少数)阴性: S-100，PSA，P504S

（6）腺癌

阳性: CK20，CDX2，villin，MUC1，MUC2，S-100(＜20%），CA125阴性: CK7（5%可阳性），CgA，Syn，MUC5A，CK5/6,GCDF-15,TTF-1,HPC

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四

注意事项

1

抗体不仅在(可疑)病变区域表达,整张切片中符合要求的正常组织也可以表达。即判断抗体表达阴性或是阳性时,需要清楚抗体在目的区域的表达情况。即所要观察可疑病变组织中的表达情况。例如, CK在正常上皮组织中也有表达; Ki-67在腺颈部干细胞区表达活跃,甚至在肠上皮化生部位也呈阳性表达; 在正常组织细胞中, Syn和CgA也有灶状表达。

2

同理,所谓的肿瘤标志物在正常人的血清和组织中都可以表达,只不过是在一定范围内表达。超过这一范围,则认为一定有问题,或考虑有问题的可能性大;反过来,肿瘤标志物阴性不能下结论,说: '这个患者的这个组织一定没问题!'因为导致肿瘤形成的因素很多,也十分复杂,某些标志物阴性,只能说明已知病变没有通过这些标志物所在的通路导致病变发生。而病理免疫组化诊断还要结合HE形态学观察结果,以及患者的临床表现和影像学检查结果综合判断。

3

验证一个问题的一组抗体,或者多个抗体,表达情况可能不一致,需要综合分析。例如,验证组织细胞为神经内分泌细胞起源时,可能存在Syn(+),CgA(-)的情况。

4

染色结束后,还需要复染细胞核,以确定抗体表达的亚细胞定位。

5

Ki-67阳性率:每次计数一个视野中100个肿瘤细胞中有已知抗体表达的细胞数量,但不能把也算入肿瘤细胞中参与计数。

五

参考文献

[1] 刘彤华.《诊断病理学》[M].北京:人民卫生出版社，2013.

[2] 刘旭明，何建方.《现代诊断病理学》[M].广东：中山大学出版社，2006.

[3] 芬诺格利奥-普赖瑟(美) 译者:回允中.《胃肠病理学(第3版)》[M].北京：北京大学医学出版社，2011

[4] 司传平，丁剑冰.《医学免疫学》[M].北京：高等教育出版社，2014.

征稿

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